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2026/08/04 11:21 I 阅读:19
应用领域
生物研究
检测样品
其他
检测项目
蛋白
参考标准
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发布时间
2026/08/04
方案详情
1. 实验目的 利用YQ-A420迷你叠加摇床的精确加热制冷功能,通过温度转换,诱导目标蛋白(如在大肠杆菌中)实现可控表达,并利用其叠加设计进行多温度条件的平行优化。 2. 核心设备与关键参数 设备:上海赫田YQ-A420迷你叠加摇床(加热制冷款)。 关键设定参数: 生长阶段:温度 37℃,振荡频率 220 rpm,振幅 Φ26mm。 诱导阶段:目标诱导温度(如 16℃、25℃、37℃ 进行平行对比),振荡频率不变。 定时:利用分段定时功能(每段0~999min/h),可预设“生长-诱导”自动切换程序。 3. 实验流程(两阶段法) 第一阶段:菌体扩增。将携带质粒的宿主菌接种于培养基,在 37℃、220 rpm 条件下培养至对数生长期(OD600≈0.6-0.8)。 第二阶段:降温诱导。加入诱导剂(如IPTG)后,立即将摇床设定温度更改为目标诱导温度(如25℃),利用设备制冷功能快速降温,并继续振荡培养适当时间(如4-16小时)。 4. 关键操作要点 平行优化:可使用2-3台叠加的YQ-A420,分别设定不同诱导温度(如16℃、25℃、37℃),将同一批诱导后的培养物同时放入,实现高效的条件筛选。 取样检测:在诱导后不同时间点取样,测定OD600并收集菌体,通过SDS-PAGE等方法检测目标蛋白表达量(可溶性/包涵体分布)。 温度切换效率:依赖设备从37℃降至目标低温(如25℃)的速率和稳定性,确保诱导条件的精确控制。 5. 注意事项 制冷效率:当设定诱导温度远低于室温时(如16℃),需确保实验室环境温度适中,以保证设备能有效制冷。
产品配置单
前处理设备
分析软件
下载方案
温度诱导型蛋白表达实验使用加热制冷款摇床.docx
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